你听过一个有关警察、歌手、神经病和黑手党公主的故事吗？《猛禽小队和哈莉·奎茵》是一个只有哈莉·奎茵本人才能讲出来的超乎寻常的奇妙传奇。哥谭市最为凶残自大的恶棍罗曼·赛恩尼斯和他狂热的手下萨斯为了寻找一个年轻女孩卡斯，将这座城市翻了个底朝天。哈莉、女猎手、黑金丝雀和蕾妮·蒙托亚不期而遇，看似违和的四人组不得不团结一致、携手作战，才有可能打败罗曼。
击败女巫四年后，小丑与哈莉·奎茵分手，并将她扔在哥谭市的街道上。她被一家台湾餐馆的老板多克收养，并通过剪掉头发、收养一只斑点鬣狗和参加轮滑德比赛来摆脱这段关系。
哈利在残忍的犯罪头目罗曼·西奥尼斯拥有的一家夜总会里喝醉了，并在侮辱她后打残了他的司机。她遇到了滑稽歌手黛娜·兰斯，后者后来从一次绑架未遂中救出了喝醉的哈莉。西恩尼斯对黛娜的战斗技巧印象深刻，任命她为他的新司机。第二天晚上，哈利再次喝醉，无意中听到她的一些酒友争论她是否真的与小丑分手，于是炸毁了艾斯化学工厂，公开宣布分手。当每个人都发现她不再受到小丑的保护时，哈利开始受到所有以前对她怀恨在心的罪犯的攻击。
与此同时，GCPD警探蕾妮·蒙托亚 (Renee Montoya)正在调查由一名持弩的治安维持者实施的一系列暴民杀戮事件。她试图招募黛娜作为线人，但她拒绝了这一提议，因为 GCPD 无法阻止她母亲的死亡。西奥尼斯派黛娜和他的施虐得力助手维克多·萨斯去取回一颗钻石，上面镶嵌着贝尔蒂内利犯罪家族的财富账号，该家族多年前被屠杀。年轻的扒手卡桑德拉·“卡斯”·凯恩从萨斯手中偷走了钻石，并在她被捕后吞下了它。
逃离蒙托亚和其他几个人的哈利被西奥尼斯的手下抓获。西奥尼斯在死亡威胁下派哈利为他取回钻石，并悬赏卡桑德拉。哈利用装满油漆和闪光子弹的手榴弹枪闯入 GCPD，释放了卡桑德拉，两人逃脱。当躲在哈利的公寓时，他们建立了联系。“弩杀手”向医生寻求信息，而这名杀手就是海伦娜·贝尔蒂内利 (Helena Bertinelli)。海伦娜在家人大屠杀中幸存下来并接受了刺客训练，她一直把目标瞄准了每一个对她家人谋杀负有责任的歹徒，她更喜欢“女猎手”这个绰号。哈雷的住所后来被寻找卡桑德拉的犯罪分子轰炸，多克承认他出卖了哈雷。哈利打电话给西恩尼斯，提出将她交出以换取他的保护，并同意在一个废弃的游乐园见面。黛娜通知蒙托亚约会，但萨斯发现了她的背叛，并通知了西奥尼斯。悲痛欲绝的西奥尼斯戴上了他的仪式面具，他的绰号就是“黑面具”。
在公园里，蒙托亚与哈利对峙，但被踢出窗外。萨斯到达并镇静了哈利，然后用枪指着黛娜，但他被海伦娜杀死，海伦娜透露他是最后一个杀害她家人的凶手。蒙托亚归来并透露西奥尼斯是贝尔蒂内利斯大屠杀的真正策划者。他为了得到钻石而杀死了他们。随后发生了对峙，直到他们意识到西恩尼斯带着一小群蒙面罪犯来到了这里。由五名女性组成的临时小组使用哈雷的旧装备，抵挡并击退了攻击。在战斗中，卡珊德拉被西奥尼斯俘虏，而黛娜则展现了她的超人类能力超音速级别的尖叫能力，击败了数名黑帮。哈雷骑着溜冰鞋追赶，在海伦娜的帮助下，两人追上了西恩尼斯。在附近的码头，西奥尼斯准备杀死卡桑德拉，卡桑德拉从哈利的武器箱中取出手榴弹，取出戒指。就在手榴弹爆炸之前，哈利把他从码头上扔了下去，杀死了他。
摧毁西奥尼斯的犯罪帝国后，蒙托亚退出了 GCPD。海伦娜利用隐藏在钻石内的账户中的资金，与黛娜和蒙托亚一起建立了一支名为“猛禽小队”的义务警队。哈利和卡桑德拉逃脱，将钻石卖给当铺并开始自己的生意。